摘    要

为了初步探究DNA甲基转移酶1（SlMET1）对番茄种子胎萌的影响，本实验采用病毒诱导基因的沉默技术沉默番茄果实中DNA甲基转移酶1基因（SlMET1），通过观察果实内种子胎萌情况以及分析SlMET1基因表达量的变化，从而分析SlMET1可能参与调控番茄种子休眠的调控机制。结果显示，在野生型AC果实发育过程中，干涉DNA甲基转移酶SlMET1基因表达并不会诱发种子胎萌，由此推测出SlMET1可能并没有参与调控番茄种子休眠，这为后续实验利用Western blot技术通过检测蛋白质表达情况进行验证奠定了基础。

关键词：番茄种子： 胎萌： DNA甲基转移酶1（SlMET1）基因

目   录

引言

1 材料与方法

1.1 材料

1.2 主要试剂和仪器

1.3 病毒沉默载体的构建

1.4 体外转录

1.5 摩擦接种与病叶收集

1.6 发病叶内目标病毒表达情况

1.6.1 提取烟草发病叶RNA

1.6.2 检测RNA浓度

1.6.3 逆转录获取cDNA

1.6.4 PCR进行验证

1.7 病汁液注射果柄

1.8 番茄种子胎萌现象记录及胎萌番茄果皮、组织的收集

1.9 DNA甲基转移酶1基因表达量的测定

1.9.1 RNA提取

1.9.2 检测RNA浓度

1.9.3 合成第一链cDNA

1.9.4 SlMET1基因表达量测定

2 实验结果与分析

2.1 体外转录结果分析

2.2 烟草发病叶PCR验证结果分析

2.3 番茄种子胎萌结果分析

2.4 SlMET1基因表达量测定结果

3总结与讨论

3.1总结

3.2讨论

参考文献

致谢