摘要

番茄是茄科茄属番茄亚属多年生草本植物，具有基因组小、生长周期短、进化史长和易培养等优点，是研究肉质鲜果发育和成熟的模式作物。近几年的研究表明，除了遗传模型，表观遗传的控制对番茄成熟与发育起着非常重要的影响。本研究立足于DNA甲基转移酶介导的表观遗传调控SlCMT3，利用Crispr/cas9系统构建番茄SlCMT3基因敲除株系，研究成果不仅可以在理论上帮助揭示SlCMT3依赖的表观遗传修饰在番茄果实成熟中的分子机制，也为促进番茄种质资源的鉴定及深度开发奠定基础。

关键词：番茄； Crispr/cas9； SlCMT3基因； 基因敲除； 表观遗传

目录

1 引言 4

2 材料与方法 6

2.1 实验材料 6

2.2 实验方法 6

2.2.1 Crispr/cas9介导的靶向基因编辑载体构建 6

2.2.2 Crispr/cas9 系统介导的农杆菌转化番茄子叶 10

3 结果与分析 11

3.1 Crispr/cas9 介导的靶向基因编辑载体 11

图1 DNA甲基转移酶SlCMT3基因敲除载体构建 12

图2 DNA甲基转移酶SlCMT3基因敲除载体测序比对图 12

图3 SlCMT3基因敲除载体转化农杆菌后的菌液PCR扩增电泳图 12

3.2 Crispr/cas9系统介导的农杆菌转化番茄子叶 12

图4 SlCMT3基因敲除载体遗传转化番茄 13

4 讨论与展望 14

5 参考文献 14

6 致谢 15