摘    要

    

 

多年来，随着中国灵芝行业市场规模的迅速扩大，灵芝已经成为现如今炙手可热的一款热门产品。由于灵芝孢子在人工条件下萌发率极低，无法通过传统的单孢分离技术来进行杂交育种。所以针对灵芝原生质体单核化来实现获得杂交育种所需材料，这也就是目前灵芝新品种选育使用最广泛，效果最为显著的一项技术。在种植生产或菌种保存的过程中，具有明显优势的菌种难以长时间保持其优良性状。随着时间的推移，出现不良性状甚至退化现象的频率愈来愈高，导致目前灵芝物种和品质资源的利用形势严峻。本试验通过原生质体单核化技术，获得了13株灵芝单核菌株作为杂交育种材料，将筛选出的单核菌株进行两两配对。根据锁状联合有无和拮抗反应验证，最终共得到10株杂交菌株。

 

目    录

 

1. 引言 4

1.1研究背景 4

1.2研究目的与意义 4

1.3研究现状 5

1.3.1国内研究现状 5

1.3.2国外研究现状 6

2.材料与方法 6

2.1试验材料 6

2.2试验方法 6

2.3试验步骤 7

2.3.1原生质体的制备 7

2.3.2单-单配对试验 7

2.3.3杂交菌株的纯化 7

2.3.4杂交菌株的初步验证 7

2.3.5锁状联合观察 7

2.3.6核染色的方法 7

2.3.7杂交菌株的分子验证 8

2.3.8杂交菌株的出菇试验 8

3. 结果与分析 8

3.1获得单核菌丝 8

3.2交配型的确定 9

3.3获得杂交菌株 9

3.4拮抗试验 10

3.5出菇试验 10

4. 总结与展望 12