摘    要

碱性亮氨酸拉链（bZIP）蛋白是一类重要的转录因子，它参与调控植物的多种非生物胁迫响应，是植物体内应对盐胁迫的“调控开关”。因此，运用分子生物学手段，在作物中调控特定bZIP的表达水平可有效提高转基因植株的耐盐性。作为bZIP家族的一员，PTF20在前期的研究中发现它在植物耐盐胁迫中起正调控作用。而蛋白质的磷酸化可以改变植物受体蛋白的活性，快速传递胁迫信号并与其他蛋白质修饰相互作用，并调节植物体内的免疫调控和信号转导等过程来促进植物产生能减弱或消除逆境条件下对植物的毒害作用的物质。本研究旨在分析PTF20对大豆耐盐响应的调控机制。结果表明，PTF20磷酸化修饰在大豆耐盐中：（1）正调控PTF20的转录表达；（2）促进根细胞脯氨酸的合成，提高过氧化物酶活性，减少丙二醛积累；（3）显著改善大豆在盐胁迫下的生物量等耐盐性状。可见，大豆转录因子PTF20磷酸化修饰可调节活性氧化物（ROS）的平衡来提高植物的抗盐性。本实验将为bZIP类转录因子的分子机制与植物耐盐响应的关系奠定基础。

目    录

引言 4

1 材料和方法 4

1.1 材料与仪器 4

1.2 发根农杆菌K599转化 5

1.3 发根农杆菌介导的植物基因转化 5

1.4 突变植株培养 5

1.5 实时荧光定量PCR 6

1.6 测定样本过氧化物酶含量、丙二醛含量和脯氨酸含量 6

2 结果与分析 6

2.1 农杆菌K599过表达质粒提取与酶切验证 7

2.2 农杆菌介导的植物基因转化与培养 7

2.3 转基因大豆植株表型分析 8

2.4 转基因大豆根中转录表达水平分析 9

2.5 盐胁迫下生理生化分析 9

3 结论与讨论 10

参考文献 11

致谢 12