摘    要

    拟南芥是一种广泛应用的模式植物，WRKY转录因子是只有植物具有的转录因子，我们选取了WRKY基因家族中的WRKY75为实验材料，对其抗病表型进行分析。利用三引物法鉴定wrky75纯合突变体植株，再通过半定量RT-PCR检测WRKY75基因在突变体中的表达情况，最后用丁香假单胞杆菌番茄致病变种DC3000株(Pst DC3000)侵染野生型植株和突变体植株。得到WRKY75表达量在突变体中下调表达，wrky75突变体植株的抗病性减弱的结论。本实验的目的在于通过对wrky75突变体抗病表型的分析，为后续提高植株抗病性的研究做铺垫。

目    录

摘    要 2

Abstract 2

1 引言 4

1.1 拟南芥介绍 4

1.2 植物免疫 4

1.3 WRKY转录因子 5

1.3.1 WRKY转录因子结构特点 5

1.3.2 WRKY转录因子在逆境中的作用 6

1.4 WRKY75转录因子 6

1.5 本课题研究意义 7

2 材料与方法 7

2.1 供试材料 7

2.2 实验方法 7

2.2.1 拟南芥的培育 7

2.2.2 从拟南芥提取植物基因组总DNA 8

2.2.3 三引物扩增法鉴定wrky75纯合突变体 9

2.2.4拟南芥中植物基因组RNA的提取 10

2.2.5总RNA反转录成cDNA 11

2.2.6突变体植株抗病表型分析 12

3 实验结果与分析 13

3.1 三引物法鉴定纯合突变体 13

3.2  RT-PCR分析突变体中WRKY75基因的表达量 14

3.3 突变体材料的抗病表型鉴定 15

4 讨论 15

参考文献 17

致谢 18