摘    要

    手性胺是一类具有重要价值的医药、精细化工中间体，在许多领域发挥着重要作用。而转氨酶作为合成手性胺的重要催化剂是研究者关注的问题之一。本研究首先通过提供不同的胺供体作为转氨酶ATA-117转氨反应的底物，从中选出了最适于反应的胺供体为异丙胺。再通过控制反应条件，确定了ATA-117的最适反应温度和反应pH值分别为50℃和9.0。根据以上条件并参考相关研究，通过加入过量异丙胺或吹出副产物丙酮的方法分别将转化率提高到了96.34%和65.93%。

目    录

摘    要 2

Abstract 2

1 引言 4

1.1 简介 4

1.2 转氨酶 4

1.3 新酶的筛选改造 5

1.4 转氨酶合成手性胺的方式 6

2 材料方法 8

2.1 菌株与质粒 8

2.2 主要试剂及仪器 8

2.3 抗生素及诱导剂母液配置： 9

2.4 培养基 10

2.5 主要缓冲液： 10

2.6 大肠杆菌感受态制备 12

2.7 转氨酶的表达与粗酶液的获得 12

2.8 转氨酶酶学性质 14

2.9 不同胺供体对于转氨反应的影响 14

2.10 转氨酶的最适温度 14

2.11 转氨酶的最适pH 15

2.12 推动转氨反应平衡移动的方法 15

3 结果 17

3.1 分析方法 17

3.2 转氨酶粗酶液的获得 17

3.3 转氨酶酶学性质 18

4 分析与讨论 21

5 展望 21

参考文献 22

致谢 22