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摘 要
蝉拟青霉是蝉花的寄生真菌，具有较高食用、营养和药用价值，被认为是冬虫夏草最佳替代珍贵菌类。近年来，蝉拟青霉代谢产物抑菌活性研究受到广泛关注。为此，本课题就蝉拟青霉代谢产物中抑菌活性物质分离纯化及稳定性进行研究。采用硫酸铵盐析、Sephadex G-50柱层析、SDS-Page电泳分离纯化蝉拟青霉代谢产物中抑菌活性物质，并探究其耐酸碱性、耐热性、耐紫外线性、耐蛋白酶性等稳定性。研究表明，经过一系列方法可初步分离到纯度较高的蝉拟青霉抑菌活性物质，并初步证明其为一种分子量小于10 kD的蛋白或肽类物质。该物质的稳定性一般，但是耐紫外线性非常好。本论文研究结果为高效生产稳定性好的蝉拟青霉抑菌活性物质提供理论依据。
目 录
1 引言 4
2 实验试剂与仪器 5
2.1 实验材料 5
2.2 实验试剂 5
2.3 实验仪器 6
3 实验方法 7
3.1 蝉拟青霉代谢产物初步分离纯化 7
3.1.1 蝉拟青霉发酵 7
3.1.2 蝉拟青霉发酵液抑菌活性测定 7
3.1.3 硫酸铵盐析 7
3.1.4 Sephadex G-50柱层析 8
3.1.5 分离组分蛋白质浓度 8
3.1.6 SDS-Page电泳 9
3.2 蝉拟青霉代谢产物稳定性研究 10
3.2.1 耐酸碱性 10
3.2.2 耐热性 10
3.2.3 耐紫外线性 10
3.2.4 耐蛋白酶性 10
4 结果与分析 11
4.1 蝉拟青霉代谢产物初步分离纯化 11
4.1.1 蝉拟青霉发酵液抑菌活性 11
4.1.2 硫酸铵盐析 11
4.1.3 Sephadex G-50柱层析 12
4.1.4 分离组分蛋白质浓度 13
4.1.5 SDS-Page电泳 14
4.2 蝉拟青霉代谢产物稳定性研究 15
4.2.1 耐酸碱性 15
4.2.2 耐热性 16
4.2.3 耐紫外线性 17
4.2.4 耐蛋白酶性 17
5 结论 19
6 展望 19
参考文献 20
致谢 21
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