摘    要

白纹伊蚊Aedes albopictus是一种水生双翅目昆虫，其生长发育受水体环境因素的影响。卵黄原蛋白基因（vitellogeningene, Vg）具有雌性特异性，对重金属反应灵敏等特点。因此，检测雄性或未成熟雌性组织的卵黄原蛋白相对表达量的可应用于生物监测。同时研究白纹伊蚊卵黄原蛋白表达量及卵黄发生，为蚊虫的防治、探讨重金属镉对白纹伊蚊卵黄发生的作用机制奠定了基础。本研究设置了不同浓度（0.005 mg/L、0.01mg/L、0.1mg/L）的重金属镉处理白纹伊蚊幼虫，探究重金属镉胁迫对白纹伊蚊雄蚊卵黄原蛋白基因VgA1、VgA2、VgC相对表达量以及吸血行为对白纹伊蚊雌蚊卵黄发生的影响。研究结果表明，随着Cd2+浓度的增加，与对照组比较，白纹伊蚊雄蚊体内卵黄原蛋白基因VgA2、VgC相对表达量均极显著性下降，都在0.1mg/L Cd2+浓度到达最小值，但不呈线性关系。与上述结果不同的是，0.005mg/L和0.01mg/L Cd2+胁迫下，白纹伊蚊雄蚊体内卵黄原蛋白基因VgA1的表达水平高于对照组，其中0.005mg/L达到了极显著性水平，说明可能出现了诱导表达。与吸血前相比，吸血后对照组、0.005 mg/L、0.01mg/L、0.1mg/L白纹伊蚊雌蚊体内卵黄原蛋白基因VgA1、VgA2、VgC相对表达量均增加，除0.1mg/L卵黄原蛋白基因VgA1、VgA2外，其余各组均有极显著性差异。

目    录

摘    要 2

1 镉污染概况 4

2 镉对昆虫的危害 4

3 昆虫卵黄蛋白的特性及卵黄发生 4

3.1 卵黄蛋白的结构 4

3.2 Vg的合成与分泌 5

3.3 外界因子对卵黄合成的影响 5

3.3.1 食物对Vg合成的影响 5

3.3.2 温度对Vg合成的影响 5

3.3.3 激素对Vg合成的影响 5

3.3.4 重金属对Vg合成的影响 6

3.4 卵黄蛋白原的功能及应用 6

4 重金属镉胁迫对白纹伊蚊卵黄原蛋白基因表达的影响 6

4.1 材料与方法 6

4.1.1 白纹伊蚊的饲养 6

4.1.1.1 白纹伊蚊幼虫的采集 6

4.1.1.2 饲养室环境条件 6

4.1.2 饲料 6

4.1.2.1 幼虫饲养方法 6

4.1.2.2 成蚊饲养方法 7

4.1.3 白纹伊蚊的Cd2+处理 7

4.1.3.1 试验材料 7

4.1.3.2 Cd2+浓度的确定 7

4.1.4 总RNA提取 7

4.1.5 引物的设计与合成 8

4.1.6 cDNA合成 8

4.1.7 荧光实时定量PCR 8

4.2 结果 9

4.2.1 重金属镉胁迫对雄蚊体内卵黄原蛋白基因Vg相对表达量的影响 9

4.2.2 吸血前后雌蚊体内卵黄原蛋白基因Vg相对表达量变化 10

4.3 讨论 10

参考文献 12

致谢 15