摘    要    

 

生物胺是一类低分子量含氮有机化合物的总称，它包括了组胺、酪胺、尸胺、腐胺、色胺等多种物质，广泛存在于各类生物体以及多种食品之中。适量的生物胺对人体健康有益，但摄入过量的生物胺却能够造成严重的食物中毒现象。组胺是毒性最强的生物胺，近年来一直被广泛关注着，尸胺、腐胺等对组胺毒性的增强作用也在被各大科学家引入研究课题之中。因此，生物胺的研究对食品安全非常重要。

传统的化学合成法来生产组胺是存在着很多的弊端：可操作性低，反应条件苛刻，危险性高，专一性差，转化率低，环境不友好。组氨酸酶催化脱羧工艺的开发进是需要进行一次新的探究。在上述实验方法中，限制了组氨酸酶其在组胺合成上的应用。因此，本次课题将采用生物催化法进行，通过开发酶法合成组胺，可以更加精准探究组胺，并且避免组织胺的产生。生物催化法的优点在于：反应条件温和，立体选择性好，专一性强，成本低等。本次实验内容大致分为：通过组氨酸脱羧酶表达，探讨IPTG浓度和诱导时间等对酶活的影响，检测底物浓度，pH和温度等因素对酶活的影响，从而建立酶法合成组胺工艺。

 

目    录

第一章 引言

第一节 组胺的简介

第二节 国内外的研究现状

第三节 在酶法合成中选取高效液相色谱法的优势

第二章 组氨酸酶催化脱羧的初步探究

第一节 生物胺的简介

第二节 影响组胺活性的的因素

一、 影响酶活性的主要因素——PH值

二、影响酶活性的因素——含氧量

三、影响酶活性的因素——含盐度

第三节 实验材料

第四节 实验方法

一、菌种的培养及蛋白表达

二、酶活测定方法

三、IPTG浓度和诱导时间对酶活的影响

四、PH和温度对酶活的影响

五、底物浓度对酶活的影响

六、产物浓度对酶活的影响

七、组胺的酶法合成

八、组胺的分析方法

第三章 实验结果

第一节 组氨酸脱羧酶表达

第二节IPTG浓度和诱导时间对酶活的影响

第三节pH和温度对酶活的影响

第四节 底物浓度对酶活的影响

第五节 产物浓度对酶活的影响

第六节 酶法合成组胺

第四章 总结

第一节 结果汇总

第二节 分析与讨论

参考文献

致谢