摘要： 本实验采集辽宁省大连市鲜猪肉78份，在采样后用SS选择性培养基分离疑似

沙门氏菌，划线纯化后，通过invA 序列，用常规PCR来对菌株进行鉴定，并对检测出的沙门氏菌利用纸片琼脂扩散法（K-B法）检测沙门氏菌对12种抗生素的耐药性。结果表明：共得到15株沙门氏菌，检出率为19.23%。用头孢曲松、头孢噻吩、头孢噻肟、头孢他啶、氨苄西林、氨曲南、亚胺培南、 阿莫西林、氟苯尼考、硫酸庆大霉素、盐酸诺氟沙星、盐酸环丙沙星等12种药物对检出的沙门氏菌进行药敏试验。耐药性主要分三个范围：耐药、中度耐药和敏感。沙门氏菌对各种抗生素的耐药率在0～73.3%，其中对硫酸庆大霉素的耐药率最高，为73.3%；对其他抗菌药物的耐药率依次是盐酸诺氟沙星(60%)、氟苯尼考、盐酸环丙沙星（53.3%）>阿莫西林(13.3%)>头孢噻吩(6.7%)、头孢噻肟(6.7%)、氨苄西林(6.7%)>头孢曲松（0%）、头孢他啶（0%）、氨曲南（0%）、亚胺培南（0%），共产生10种耐药谱。大连市开发区的超市和农贸市场受沙门氏菌污染率较高，并且沙门氏菌对各类抗生素表现出了多重耐药谱，应该给予足够的重视。

关键词：大连市；猪肉；沙门氏菌；耐药性

目录

摘要

Abstract

第一章-综述-1

1.1-引言-1

1.2-常见的沙门氏菌检测方法-2

1.2.1传统的培养检测方法-2

1.2.2 ELISA检测法-2

1.2.3 Transia沙门氏菌平板检测法-2

1.2.4 Transia沙门氏菌卡片检测法-2

1.2.5 PCR检测法-3

1.3-药敏试验-3

1.3.1 纸片扩散法-3

1.3.2 微量稀释法-4

1.4-研究意义与研究内容-4

1.4.1 研究意义-4

1.4.2研究目的与内容-4

第二章  猪源沙门氏菌的分离与鉴定-5

2.1材料-5

2.1.1试验菌种-5

2.1.2 药品配制-5

2.1.3培养基与试剂-5

2.1.4仪器-6

2.1.5 PCR引物合成-7

2.2方法-7

2.2.1采集样品-7

2.2.2 培养基划线-7

2.2.3挑菌-7

2.2.4增菌-8

2.2.5  PCR模板制备（水煮法）-8

2.2.6 PCR反应体系和反应条件-8

2.2.7电泳鉴定实验-9

2.3结果与分析-9

2.3.1 样品中疑似沙门氏菌分离菌株数-9

2.3.2 样品前处理-10

2.3.3 ss琼脂培养基划线-10

2.3.4挑单菌落-11

2.3.5　PCR检测-11

2.3.6结果分析-13

第三章 猪源沙门氏菌的耐药试验-14

3.1 引言-14

3.2 材料-14

3.2.1样品来源-14

3.2.2 质控菌-14

3.2.3 药敏纸片-14

3.2.4  培养基及试剂-14

3.2.5 主要仪器设备-15

3.3 方法-15

3.4结果分析-16

3.4.1 猪源沙门氏菌的耐药性-16

3.4.2 猪源沙门氏菌多重耐药谱-16

结论-18

参考文献-19

致  谢-24